河北新增90病例中超一半曾多次阴性，核酸检测多少次才能放心？
河北14日新增病例中数十人曾多次检测阴性，此前大连一病例曾11次阴性。石家庄、北京顺义重点地区进行了三轮以上检测。核酸检测要多少次？
采访专家：张永祥（北京市大兴区人民医院呼吸科主任医师）
据河北省卫健委消息，1月14日0时至24时，河北省新增90例本地新型冠状病毒肺炎确诊病例,其中石家庄市报告84例，邢台市报告6例。北京青年报记者通过梳理确诊病例行动轨迹发现，有数十人曾多次核酸检测为阴性。90个病例中一半以上曾至少3次核酸检测阴性，还有4次、5次，最多的6次。
此前，大连一位新冠确诊病例11次核酸检测才显出阳性。
为了应对新冠疫情，北京顺义区、河北石家庄进行了第二轮全员核酸采样工作，甚至对一些重点区域的重点人群进行了第三轮和第四轮核酸检测。
核酸检测为何会有这么多“漏网之鱼”？到底要检测多少次才能放心？
核酸检测如何确定阳性？
11次核酸检测才显出阳性，难道这个能让新冠病毒“现形”的技术真的失灵了？当然不是！
中华医学会感染病学分会主任委员、北京大学第一医院感染疾病科主任王贵强在接受媒体采访时表示，核酸检测本身的稳定性是好的，出现所谓检不出或者假阴性、假阳性的情况，主要是因为任何检测方法都有一个敏感性的问题。由于新冠病毒的核酸检测从原理到实践上存在差异，就有“测不准”的可能性。
北京市大兴区人民医院呼吸科主任医师张永祥告诉记者，新冠病毒与SARS冠状病毒一样，是由RNA（核糖核酸）、蛋白等组成的，最外一层由脂质和糖蛋白组成包膜外衣。RNA很容易降解（细胞内某些单独的RNA片段和链的破坏），蛋白衣壳会将RNA包裹在其中，与包膜外衣一同保护RNA。新冠病毒会通过特定细胞表面的受体入侵细胞造成感染，并且利用被感染者的细胞进行复制增殖。
以目前常用的PT-PCR技术为例，假设某人已患新冠肺炎，需要进行检查，医护人员会从他身上采集带有病毒的细胞，运送到实验室，将其充分灭活，使其原本的结构被破坏，核酸暴露，再使用试剂中的探针，查看它能否与RNA的某些关键部位发生高度的匹配，每匹配成功一次，就会产生相应的荧光信号，表明“基因身份证”得到了识别，PCR检测仪会实时记录荧光信号值。经反复检查荧光强度越来越高，检测软件上就会出现一条上升的曲线，表明检测呈阳性，证明该样本存在新冠病毒的RNA。
什么原因导致测不准？
张永祥谈到，病毒核酸检测是确诊阳性的必要条件之一。从技术层面来说，核酸检测是一个多环节的工作流程，整个检测包括采样、运输、灭活、核酸提取、PCR反应等，任何一个环节的错误操作或试剂、设备出现问题，都可能导致样本“假阴性”或者“假阳性”。
在核酸检测的实际操作中，如果核酸检测试剂盒、采样管存在质量问题，会导致从根本上不能准确测定；另外，病毒保存液提取量过小、加入到PCR体系中检测的核酸洗脱液体积过低，会导致核酸存在丢失的风险，使结果产生偏差而偏离真实值。
目前的新冠病毒核酸检测需要取咽拭子或鼻咽拭子，正确的咽拭子采集要同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，鼻咽拭子采集要轻轻插入鼻道内，在鼻腭处停留片刻后缓慢转动退出。而这两处的取材，在过去的临床实践中很少开展，所以采样人员基本都是从2020年才开始集中培训并操作，人员培训不到位势必会造成操作不统一，这也可能导致同一个人每次的核酸检测结果不一致。
有研究指出呼吸道标本检出率最高的是支气管肺泡灌洗液，其次是肺组织、抽吸痰或鼻咽吸取物，然后是鼻咽拭子或咽拭子。因此，鼻咽拭子或咽拭子检测虽方便快捷，但并不是准确率最高的方式。如果患者感染已到了病程中后期，病毒则集中在下呼吸道，鼻咽部已不是主要感染区域，鼻咽拭子或咽拭子经反复检测也可能“测不准”。
张永祥说：“不同的人，体内的病毒载量可能不同。如果体内病毒载量特别高的话，能查出来的时间就会短一些。若是病毒载量很低的话，可能就会比较难检测出结果。”
其实，也不难想象，同一批进行检测的样本，在检测试验的扩增阶段，它们的基因序列都是呈相同的倍比扩增的。对于携带病毒基因序列多的样本来说，扩增结束，病毒基因会更多，在用试剂盒检测时，可能会更接近试剂盒的最低检测限，更容易测出。而对于病毒含量本来就少的样本来说，虽然也经过相同倍比的扩增，但是在用试剂盒检测时，扩增出的病毒基因也远远少于携带病毒基因序列多的样本。也就是说，只有通过多次病毒核酸检测，才能抓住携带病毒核酸的“漏网之鱼”。
曾有患者连续进行了5次核酸检测，仅有1次为阳性，其余均为阴性。医生查阅病史得知，该患者是一位人类免疫缺陷病毒（HIV）携带者，长期服用抗HIV的药物，体内新冠病毒的载量可能因药物作用低于检测下限，导致其核酸检测反复阴性。
另外，实验室检测人员操作时，发生标本间交叉污染或实验室遗留污染等，也会导致结果不准确。对于一个规范的临床实验室，有严格的质控策略，一般可有效避免病毒核酸检测测不出、假阳性结果。还有病情变化、患者病情进展快慢不同、采样时机及时间间隔等因素，也会影响到检测结果。
核酸检测做几次才保险？
记者采访专家时了解到，由于核酸检测影响因素众多，1~2次甚至连续3次的核酸阴性结果，也并不能保证受检测者不携带新冠病毒。但对于非密切接触者，核酸检测结果更像是“通行证”——保证自己能进行一定的群体聚集活动，所以一般按需检测即可，另外同时也要注意做好防护。
所以对于一般的人来讲，不需要反复检测。对于重点对象需要反复检测，比如密切接触者，刚开始可能排出病毒量不多，咽拭子有可能没有检测到，但是不代表体内没有病毒。所以，我们要多次进行检测，单次核酸阴性对重点对象来说，其实是不保险的。
对于疑似病例或密切接触者，在未解除患病风险时，可能需要多次检测。根据第七版新型冠状病毒诊疗方案，还需通过血常规检测、肺部CT的毛玻璃状病变等筛查，还可能进行新冠特异性抗体（IgG和IgM）等检测。
此外，因为个体差异，不同人之间的耐受性、既往疾病情况不同，会对采样造成一定的影响。所以，病毒核酸检测需要做几次，还要根据众多综合影响因素来判断。
参考资料：
1.张瑞,李金明.如何减少新型冠状病毒核酸检测的假阴性[J].中华医学杂志,2020,100(011):801-804.
2.王前,王建中.临床检验医学[M].北京:人民卫生出版社,2015.
3.里进,叶光明,陈良君,等.新型冠状病毒核酸检测假阴性结果原因分析及对策[J].中华检验医学杂志,2020,43(03):221-225.
4.王达,董梁,卿松,等.新型冠状病毒核酸检测中的思维误区[J].中华医院感染学杂志,2020, 30(08):1167-1170.
5.关于印发新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）的通知
6.北京协和医院新冠病毒核酸检测告知书
河北三河疾控制中心：复阳病例密接者核酸检测为阴性
2020-08-15 11:20
8月14日，河北省廊坊市三河疾控中心发布一例新冠肺炎密切接触者外出轨迹，引发大量关注。
北青-北京头条记者获悉，经过核酸检测，这名密切接触者及与他接触的人核酸检测均为阴性。
据三河市疾控中心消息，2020年8月13日，三河市疾控中心对居住在三河市的北京新冠肺炎复阳病例的密切接触者于某，及他的4名接触者采取了集中隔离医学观察措施，并于8月13日和14日连续为他们进行了两次新冠肺炎病毒核酸检测、一次血清抗体检测，检测结果均为阴性，胸部CT检查未见异常。
北京昨新增2例本地确诊病例，曾多次核酸检测为阴性，行程轨迹公布！
1月26日，北京市政府新闻办举行疫情防控第221场例行新闻发布会， 北京市疾病预防控制中心副主任庞星火通报，1月25日0时至24时，北京市新增2例本地新冠肺炎确诊病例。相关情况通报如下：
病例1：现住大兴区天宫院街道融汇社区。1月17日开始居家隔离医学观察，多次参加社区核酸检测，结果均为阴性。1月24日出现发热、咳嗽等症状，当日核酸检测结果为阳性，1月25日转至定点医院，综合流行病学史、临床表现、实验室检测和影像学检查等结果，当日诊断为确诊病例，临床分型为普通型。
病例2：现住大兴区天宫院街道融汇社区。1月17日开始居家隔离医学观察，多次参加社区核酸检测，结果均为阴性。1月24日出现咳嗽、咽痛等症状，当日核酸检测结果为阳性，1月25日转至定点医院，综合流行病学史、临床表现、实验室检测和影像学检查等结果，当日诊断为确诊病例，临床分型为普通型。
已对上述确诊病例开展流行病学调查，对其居住等场所进行消毒，按要求落实管控措施。
根据流行病学调查，确诊病例涉及区域和场所的情况如下：
1月11日，融汇社区华联超市、果果鲜水果超市。
1月12日，融汇社区华联超市。
1月13日，天宫院凯德Mall商场地下二层永辉超市。
每日经济新闻综合人民日报、央视新闻
